Chimie

Stage 4 : Ligature et Transformation

Stage 4 : Ligature et Transformation


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Les substrats des ligases

Alors que la sortie Escherichia coli ligase isolée spécifiquement liée à des liaisons phosphodiester ouvertes décalées sur les deux brins d'ADN, la ligase T4 du bactériophage T4 lie également des fragments d'ADN linéaires à double brin sans surplomber les zones simple brin, ce que l'on appelle émoussé-Ligature. Cependant, 30 fois la quantité de ligase est nécessaire pour une telle réaction.

Noter
Seule l'ADN ligase des phages (T4 ou T7) permet une combinaison illimitée de fragments d'ADN d'origines différentes pour la production d'ADN recombinant.
Tab.1
Substrats des ADN ligases
SubstratExplication

Cette cassure simple brin (pseudo) peut également être utilisé par le E. coli-Ligase détecté et réparé.

Ici peut le E. coliLes ligas ne fonctionnent plus à la température optimale, car cette structure à 37 °C est déjà instable.

Une situation biotechnologiquement souhaitée qui est reconnue par la ligase du phage. Le 5'-OH coloré en rouge appartient au vecteur dans les expériences de clonage et empêche le vecteur de s'auto-ligaturer. Le reste pseudoest réparé dans la cellule.

Bout émoussé Ligature ! Difficile, mais toujours faisable pour le phage ligase.


Vidéo: Stories of Transformation - Luciana (Juillet 2022).


Commentaires:

  1. Engel

    Eh bien, petit à petit.

  2. Yozshunris

    Et indéfiniment ce n'est pas loin :)

  3. Ovid

    Où puis-je le trouver?

  4. Slaton

    La parole d'honneur.



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