Chimie

Méthodes de génie génétique

Méthodes de génie génétique


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Le test de la β-galactosidase

Avec ce test, qui repose sur l'utilisation de la lacLe gène Z est basé sur un gène rapporteur, des promoteurs individuels ou une cassette d'éléments régulateurs d'un opéron peuvent être examinés. Le fragment d'ADN avec les éléments régulateurs à examiner doit être cloné dans le vecteur d'expression de telle sorte que l'ARN polymérase puisse partir d'ici avec la synthèse de l'ARNm lacZ dans le sens de la transcription.

La -galactosidase sert de protéine rapporteur dans cette expérience, c'est-à-dire que la quantité d'enzyme, qui peut facilement être déterminée via la conversion d'un substrat en un colorant, est une mesure directe de la force de l'expression génique du promoteur. Un tel arrangement de test est choisi, par exemple, lorsque des éléments promoteurs individuels sont mutés ou doivent uniquement être étudiés en ce qui concerne leur importance pour l'expression génique, mais la quantité de protéine naturelle qui est transcrite à partir de ce promoteur ne peut pas être facilement mesurée. La -galactosidase peut également être utilisée dans les systèmes eucaryotes pour déterminer la force du promoteur, mais ici surtout en combinaison avec des éléments de contrôle du promoteur SV40 ou CMV (cytomégalovirus).

Noter
L'activité de la ??-La galactosidase est basée sur le substrat artificielO-Nitrophényl-β-D-glucopyranoside (ONPG) déterminé. L'enzyme??-La galactosidase clive l'ONPG en galactose et O-Le nitrophénol, qui peut être détecté par photométrie à 420 nm. La quantité de O-Le nitrophénol est directement proportionnel à la quantité produite dans la cellule ??-Galactosidase.


Vidéo: Le génie génétique pour les SVT et préparation médecine (Juin 2022).


Commentaires:

  1. Oxford

    Je m'excuse, mais je propose d'aller d'une manière différente.

  2. Kajirg

    C'est d'accord, c'est une pièce amusante

  3. Thersites

    Je pense que tu as tort. Je peux le prouver. Envoyez-moi un e-mail en MP, nous parlerons.

  4. Blane

    Vous vous êtes spécialement inscrit au forum pour vous remercier pour votre aide sur cette question.



Écrire un message